以9个产地甘草药材为原料，通过水浴回流法、超声波辅助法和微波辅助法获得甘草药材提取物，采用超高效液相色谱（UPLC）法测定甘草药材中芹糖甘草苷、甘草苷、芹糖异甘草苷、甘草查尔酮B、甘草素、刺甘草查尔酮以及甘草酸的含量，并建立指纹谱图。通过主成分分析（PCA）和正交偏最小二乘法—判别分析（OPLS-DA）研究不同提取方法对甘草药材溶出成分的影响。结果表明：不同提取方法建立的甘草指纹谱图中有30个共有峰，通过对照品指认出芹糖甘草苷、甘草苷、芹糖异甘草苷、甘草查尔酮B、甘草素、刺甘草查尔酮和甘草酸7个峰；不同提取方法甘草药材的相似度为0.832～0.985;利用PCA和OPLS-DA分析将不同提取方法甘草药材划分为3类，分别对应3种提取方法，共确定9个差异标志物，影响显著性排序分别为峰25>峰12（芹糖异甘草苷）>峰20>峰9>峰14>峰18>峰30>峰13>峰29。9批甘草药材中7种药效成分的含量采用微波辅助法提取时最高，分别是超声波辅助法的113%～135%,水浴回流法的115%～150%。微波辅助法对甘草药材溶出成分最好。