摘要:
目的 探讨三磷酸腺苷结合盒(ABC) G2在肝癌耐药细胞中的表达及其在肝癌细胞耐药中的作用.方法 MTT法检测阿霉素(ADM)作用肝癌SMMC-7721细胞24 h后半数生长抑制浓度(IC50).利用药物浓度递增细胞培养方法建立肝癌耐药细胞,在SMMC-7721细胞培养液中加入ADM,逐渐提高ADM浓度,浓度从0.001 μg/ml提高至0.100 μg/ml,使细胞在0.100 μg/ml ADM中稳定生长,命名为SMMC-7721/ADM细胞.倒置显微镜下观察SMMC-7721/ADM及其亲代SMMC-7721细胞形态.MTT法检测ADM作用肝癌耐药细胞SMMC-7721/ADM 24 h后的IC50,计算耐药指数.流式细胞术(FCM)检测SMMC-7721/ADM及其亲代SMMC-7721细胞凋亡、周期及细胞中ABCG2蛋白表达水平.结果 ADM对SMMC-7721细胞的IC50=(1.11 ±0.09) μg/ml.历时3个月时间成功使SMMC-772 1/ADM细胞在含0.100μg/ml ADM的细胞培养液中稳定生长,细胞命名为SMMC-7721/ADM.倒置显微镜下观察,SMMC-7721/ADM细胞体积增大,细胞形态变得更不规则.SMMC-7721/ADM与SMMC-7721细胞相比细胞凋亡率无显著差异(P>0.05),细胞G0/G1期显著降低(P<0.05),细胞S及G2/M期无显著差异(P>0.05).SMMC-7721/ADM与SMMC-7721细胞相比,细胞中ABCG2蛋白表达水平显著增高(P<0.05).结论 ABCG2在肝癌多药耐药细胞中异常增高,高表达的ABCG2参与了肝癌多药耐药的形成.