摘要：
目的:观察银杏叶提取物对高糖诱导的人视网膜色素上皮细胞ARPE-19细胞凋亡的影响并初步探讨可能机制.方法:体外培养ARPE-19细胞株,分为正常组(5.5 mmol·L-葡萄糖),高糖组(30 mmol·L-葡萄糖),银杏叶提取物组(30mmo1·L-1葡萄糖+12.5,25,50,100 mg·L-1银杏叶提取物).噻唑蓝(MTT)比色法检测细胞活性;流式细胞术测定细胞凋亡率;采用实时荧光定量PCR (Real-time PCR)和蛋白免疫印迹法(Westem blot)测定B细胞白血病/淋巴瘤相关抗原-2(Bcl-2),白血病/淋巴瘤相关抗原相关X蛋白(Bax),半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3(Caspase-3),凋亡相关因子(Fas),Fas受体(FasL)mRNA和蛋白的表达.Western blot检测c-Jun氨基末端激酶(JNK)磷酸化及核JNK表达变化.结果:高糖组吸光度A明显低于正常组(P＜0.05),12.5,25,50,100 mg·L-1银杏叶提取物组比高糖组A明显升高(P＜0.05);高糖组细胞凋亡率明显高于正常组,12.5,25,50,100 mg·L-1银杏叶提取物组比高糖组细胞凋亡率明显降低(P＜0.05);与正常组比较,高糖组Bax和Caspase-3,Fas和FasL表达升高(P＜0.05),12.5,25,50,100 mg·L-1银杏叶提取物组能降低Bax和Caspase-3的表达,升高Bcl-2表达水平,降低Fas和FasL表达(P＜0.05);与正常组比较,高糖组JNK磷酸化及核JNK蛋白水平升高(P＜0.05),12.5,25,50,100 mg·L-1银杏叶提取物降低JNK磷酸化及核JNK表达(P＜0.05).结论:银杏叶提取物能通过JNK通路,抑制细胞凋亡,改善糖尿病视网膜病变.
