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吸烟者肺癌组织T7噬菌体cDNA文库构建

Construction of a T7 Phage Display cDNA Library from Lung Cancer of Smokers

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资源类型:
机构: [1]河北大学生命科学学院,保定 [2]College of Osteopathic Medicine, Pomona, USA [3]河北医科大学第四医院,石家庄
出处:
ISSN:

关键词: 肺癌 噬菌体展示 cDNA文库 吸烟者

摘要:
目的:为筛选吸烟人群中早期肺癌肿瘤标志物,构建吸烟者肺癌组织T7噬菌体展示cDNA文库。方法:用RNeasy Mini Kit提取吸烟者肺癌组织总RNA,分离纯化mRNA,逆转录合成双链cDNA,经末端修饰、定向EcoRI/HindIII接头连接、接头消化,使其两端分别带有EcoRI和HindIII粘性末端。用Mini Column分离cDNA片段,收集300 bp以上的双链cDNA,与T7Select 10-3b载体连接,体外包装后,以BLT5615为受体菌得到吸烟者肺癌组织T7噬菌体展示cDNA文库。结果:经测定,库容为1.35 × 106 pfu,扩增后文库滴度为4.4 × 1010 pfu/ml。PCR鉴定从原始文库中随机挑取的100个噬菌斑,重组率为97%,重组体中91%的插入片段长度>300 bp。结论:成功构建了吸烟者肺癌组织T7噬菌体cDNA文库,为下一步筛选吸烟人群中早期肺癌肿瘤标志物奠定基础。

语种:
第一作者:
第一作者机构: [1]河北大学生命科学学院,保定
通讯作者:
通讯机构: [1]河北大学生命科学学院,保定 [2]College of Osteopathic Medicine, Pomona, USA
推荐引用方式(GB/T 7714):

资源点击量:42329 今日访问量:0 总访问量:1365 更新日期:2025-08-01 建议使用谷歌、火狐浏览器 常见问题

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