资源类型：
收录情况：
◇ 统计源期刊
◇ 北大核心
◇ CSCD-C
文章类型：
机构：
[1]河北医科大学第四医院妇产科,石家庄,050011
临床科室
妇科
河北医科大学第四医院
[2]河北医科大学基础医学院免疫教研室,石家庄,050017
出处：
ISSN：
关键词：
白细胞介素8
卵巢肿瘤
pcDNA3
1(+)真核表达载体
肿瘤生长增殖
摘要：
目的:构建白细胞介素8(interleukin 8,IL-8)基因真核表达载体,瞬时转染OVCAR-3卵巢癌细胞,为进一步探讨其与肿瘤发生发展关系奠定基础.方法:采用RT-PCR法自健康志愿者外周血单个核细胞扩增IL-8基因,构建pcDNA3.1(+)/IL-8重组质粒;脂质体介导将外源基因转入OVCAR-3卵巢癌细胞,半定量RT-PCR、Western印迹及ELISA法鉴定其mRNA及蛋白瞬时表达后,MTT法检测细胞转染前后生长增殖特性的改变,FCM检测细胞周期的变化.结果:重组质粒双酶切电泳结果显示,相应位置(300 bp,5 400 bp)可见2条清晰特异的DNA条带;DNA测序结果进一步显示,重组质粒中插入的基因片段全长 300 bp,编码序列与GenBank报道的基因序列相符,阅读框保持不变;RT-PCR、Western 印迹检测及ELISA检测结果显示,转染后OVCAR-3细胞IL-8 mRNA及蛋白表达水平均明显升高(P<0.05);MTT检测结果显示,IL-8转染细胞组转染3 d后的光密度值(D值)显著高于未转染细胞组(P<0.05);FCM分析结果显示,OVCAR-3细胞转染IL-8基因后进入S期的细胞比例显著增高,增殖指数也相应上升,与未转染及空质粒转染组细胞相比,差异显著(P<0.05).结论:IL-8基因真核表达载体成功构建并瞬时转染OVCAR-3卵巢癌细胞;IL-8可以自分泌方式促进卵巢癌OVCAR-3细胞生长增殖.
基金：
河北省医学科研课题(05013);河北省强势特色学科基金
第一作者：
第一作者机构：
[1]河北医科大学第四医院妇产科,石家庄,050011
通讯作者：
通讯机构：
[1]河北医科大学第四医院妇产科,石家庄,050011
推荐引用方式(GB/T 7714)：
李万胜,胡洁,赵娟,等.IL-8基因真核表达载体的构建及其在OVCAR-3卵巢癌细胞中的表达[J].军事医学科学院院刊.2008,32(2):144-147.
