目的：探讨微小RNA-125a-5p（miR-125a-5p）基于核因子-κB（NF-κB）和有丝分裂原活化蛋白激酶（MAPK）信号通路诱导乳腺癌MCF7细胞自噬的作用机制。方法：取对数期生长乳腺癌MCF7细胞，分为miR-125a-5p组、miR-NC组和空白组，采用慢病毒转染法将hsa-miR-125a-5p mimics、NC-mimics分别转染至miR-125a-5p组和miR-NC组，空白组不给予处理。采用实时荧光定量聚合酶链反应（RT-qPCR）检测转染后各组细胞miR-125a-5p基因相对表达量；采用单丹磺酰二胺及Hoechst双染色检测各组细胞自噬情况，并采用Western blot法检测自噬相关蛋白（Beclin-1）、微管相关蛋白l轻链3-II （LC3II）表达情况；采用RT-qPCR、Western blot法检测各组细胞NF-κB/MAPK信号通路相关基因及蛋白相对表达量。结果：空白组、miR-NC组、miR-125a-5p组细胞miR-125a-5p基因相对表达量分别为（0.44±0.08）、（0.42±0.07）、（1.27±0.16），miR-125a-5p组miR-125a-5p基因相对表达量高于空白组和miR-NC组，差异有统计学意义（P＜0.05）；空白组、miR-NC组、miR-125a-5p组细胞阳性率分别为（2.10±0.52）%、（2.30±0.47）%、（26.40±7.14）%，miR-125a-5p组细胞阳性率高于空白组和miR-NC组，差异有统计学意义（P＜0.05）；miR-125a-5p组自噬相关蛋白——Beclin1、LC3II蛋白相对表达量高于空白组和miR-NC组，差异有统计学意义（P＜0.05）。3组NF-κB p65、细胞外调节蛋白激酶（ERK1/2）、MAPK p38 mRNA相对表达量比较，差异均无统计学意义（P＞0.05）；miR-125a-5p组NF-κB/MAPK信号通路磷酸化蛋白与相应蛋白比值p-NF-κB p65/NF-κB p65、p-ERK1/2/ERK1/2、p-MAPK p38/MAPK p38均高于空白组和miR-NC组，差异均有统计学意义（P＜0.05）。结论：过表达miR-125a-5p基因可诱导乳腺癌MCF7细胞发生自噬，可能与NF-κB/MAPK信号通路激活有关。