资源类型:
申请人:
河北医科大学第四医院(河北省肿瘤医院)
;
河北医科大学
;
当前专利权人:
河北医科大学第四医院(河北省肿瘤医院)
;
河北医科大学
;
申请号:
申请日期:
授权年份:
公开号:
公开日:
法律状态:
摘要:
本发明涉及一种幽门螺杆菌的大规模培养方法,其利用幽门螺杆菌液‑固培养装置并包括如下步骤:(A)用1mg/ml纤维蛋白原包被搅拌器;(B)固体培养基的制备;(C)幽门螺杆菌配制成1×10 9 个/ml菌液,注入幽门螺杆菌液‑固培养装置,涂布细菌,进行固体培养基培养;(D)制备液体培养基;(E)幽门螺杆菌先在固体培养基培养12个小时后,注入液体培养基,液体培养基培养12个小时后,搅拌下再继续培养1‑2天,将液体培养基放出,收集幽门螺杆菌。本发明培养周期短、操作简便且获得幽门螺杆菌的数量多,为制备灭活的全菌疫苗提供了基础条件。
主权项:
1.一种幽门螺杆菌的大规模培养方法,其特征在于,其利用幽门螺杆菌液-固培养装置并包括如下步骤:(A)用1mg/ml纤维蛋白原包被幽门螺杆菌液-固培养装置中的搅拌器;(B)固体培养基的制备:称取3.9g哥伦比亚血琼脂放入100ml蒸馏水,置于高压蒸汽灭菌器高压灭菌,待逐渐冷却至60℃左右,加入10ml胎牛血清后立即注入幽门螺杆菌液-固培养装置,待冷却凝固;(C)幽门螺杆菌配制成1×10 9 个/ml菌液,注入幽门螺杆菌液-固培养装置的固体培养部,涂布幽门螺杆菌,进行固体培养基培养,培养温度为37℃,通气量为1L/min的洁净的混合气体;(D)制备液体培养基:称取3.7g 脑心浸出液肉汤置于100ml蒸馏水中,置于高压蒸汽灭菌器高压灭菌,待逐渐冷却至常温,加入10ml胎牛血清备用;(E)幽门螺杆菌在固体培养培养12个小时后,制得的液体培养基注入幽门螺杆菌液-固培养装置的液体培养部,进行液体培养基静置培养,培养温度为37℃,通气量为1L/min的洁净混合气体;培养12个小时后,以20转/min搅拌液体培养基,继续培养1-2天,将液体培养基放出,收集幽门螺杆菌。