目的探索微小RNA（miR）-340-5p在胰腺导管腺癌细胞（PDAC）中表达及影响其生物学行为的机制。方法实时定量反转录聚合酶链反应（RT-qPCR）检测40例胰腺导管腺癌与正常细胞中miR-340-5p的表达, 研究其表达水平与临床特征之间的联系。检测不同胰腺导管腺癌细胞及人胰腺导管上皮细胞中miR-340-5p水平。miR-340-5p模拟物转染PDAC细胞株PANC-1;甲基噻唑蓝（MTT）比色法检测细胞增殖活性;划痕实验、Transwell侵袭实验检测细胞侵袭迁移能力。RT-qPCR及蛋白质印迹法（Western blot）检测N-钙黏蛋白（N-cadherin）、波形蛋白（Vimentin）、E-钙黏蛋白（E-cadherin）、基质金属蛋白酶-9（MMP-9）的表达。双荧光素酶报告基因分析实验检测miR-340-5p对RhoA的调控功能。结果 PDAC组织中miR-340-5p水平低于正常胰腺组织（0.362 4±0.083 7、0.965 2±0.129 9, t=21.272, P＆lt;0.01）;PDAC中miR-340-5p表达降低与胰腺癌淋巴结转移（χ2=7.782, P＆lt;0.01）、肝转移（χ2=17.109, P＆lt;0.01）有相关。双荧光素酶报告基因分析结果表明, 野生型RhoA的荧光素酶活性在转染miR-340-5p模拟物后低于对照组（0.992 5±0.099 8比0.177 5±0.019 0, t=18.496, P＆lt;0.01）。转染后, 转染组细胞增殖活性降低(0.505 2±0.077 1比1.031 0±0.069 1、1.029 5±0.113 5, t=38.012、7.637, P＆lt;0.01、迁移距离减少（0.753 3±0.050 1、0.725 0±0.071 5比0.338 3±0.087 7, t=11.098、7.031, P＆lt;0.01）、迁移细胞数减少（57.000 0±4.290 0、52.666 7±5.785 0比19.833 3±2.994 0, P＆lt;0.01）。Western blot及RT-qPCR结果显示, 与空白对照组（NC）及阴性对照组（Scramble）比较, miR-340-5p模拟物转染组N-cadherin（1.048 3±0.076 9、1.040 7±0.079 2比0.457 3±0.074 5, t=11.800、11.585, P＆lt;0.01）、Vimentin（1.045 3±0.062 8、0.993 3±0.068 6比0.521 7±0.057 9, t=10.982、9.585, P＆lt;0.05）、MMP-9（1.047 0±0.069 6、1.154 3±0.101 1比0.560 3±0.457 1, t=32.803、18.559, P＆lt;0.01）表达显著降低, E-cadherin（1.053 3±0.100 3、0.987 7±0.083 4比1.976 0±0.154 2, t=-29.502、-24.203, P＆lt;0.01）表达升高。结论胰腺导管腺癌中miR-340-5p表达降低, 过表达miR-340-5p后能明显抑制PANC-1细胞的体外增殖和转移。其对RhoA信号通路介导的上皮-间充质转化（EMT）进程具有潜在抑制作用。