目的:对水痘-带状疱疹病毒（varicella-zoster virus，VZV）病毒滴定方法进行优化，并应用于中和抗体检测和抗病毒药物体外检测。方法:采用VZV疫苗株Voka株在48孔板感染人视网膜上皮细胞（adult retinal pigment epithelial cell line-19，ARPE-19），连续7 d检测感染后病毒复制动力学与蚀斑特点；分别建立并优化活病毒滴定的蚀斑染色法和酶联免疫斑点法（enzyme linked immunospot assay，ELISPOT），同时对两种方法检测结果的相关性进行分析，并将改进后的方法应用于VZV药物抑制效果检测和血清中和抗体检测。结果:VZV感染ARPE-19细胞（感染复数为0.05）后，第6天到达复制顶峰并形成肉眼可见蚀斑；蚀斑染色法中，添加0.2 mg/mL二乙胺乙基葡聚糖（diethylaminoethyl-dextran，DEAE-Dextran）后，较未添加组产生更大与边缘更加清晰的蚀斑。ELISPOT法可在感染后第3天进行计数，同时通过改变检测用抗体与显色液等，可产生更加清晰可计的斑点。两种方法可采用机器计数，检测病毒滴度或应用于体外检测抗VZV药物效力与血清中和抗体滴度，具有良好的相关性。结论:优化后ELISPOT法快捷灵敏，可替代蚀斑染色法应用于VZV病毒滴度检测与相关应用。本研究为VZV的检测及疫苗药物研发提供了更简捷可靠的实验方法。