目的 探讨miR-204-5p在结直肠癌奥沙利铂(L-OHP)化疗耐药性中的作用及潜在分子机制。方法 比较L-OHP耐药及非耐药结直肠癌组织及细胞中miR-204-5p的表达水平；检测过表达miR-204-5p后结直肠癌细胞系的细胞活力、增殖及凋亡水平；TargetScan信息学分析miR-204-5p的作用靶点并利用双荧光素酶报告实验进行验证；检测过表达miR-204-5p及酪氨酸蛋白激酶受体B6抗体(EPHB6)后结直肠癌细胞系的增殖及凋亡水平。结果 miR-204-5p在L-OHP耐药癌组织及细胞中的表达显著降低(P(0.05);过表达miR-204-5p后结直肠癌细胞系细胞活力及增殖能力显著降低、细胞凋亡显著增加(P(0.05);TargetScan信息学分析显示，EPHB6可能为miR-204-5p的作用靶点；过表达miR-204-5p及EPHB6后结直肠癌细胞系细胞增殖能力显著增加，凋亡水平显著降低(P(0.01,P(0.001)。结论 miR-204-5p可通过靶向EPHB6降低结直肠癌细胞对L-OHP的耐药性。