目的:探讨食管鳞状细胞癌(esophageal squamous cell carcinoma,ESCC)组织中蛋白酪氨酸磷酸酶1(protein tyrosin phosphatase 1,SHP-1)基因异常低表达的表观遗传学调节机制及其临床意义.方法:所用组织标本均来自河北医科大学第四医院2008-2011年行食管癌根治术并且病理诊断为ESCC患者的癌组织及相应癌旁组织(距癌灶边缘2 cm以上),共71例.ESCC细胞株(Eca109、Kyse170、Yes-2)培养完成后,进行甲基化抑制剂5-Aza-dC或组蛋白去乙酰化酶抑制剂TSA处理,qPCR和West-ern blotting实验检测ESCC组织和细胞系中SHP-1 mRNA和蛋白的表达变化,亚硫酸氢盐基因组测序(bisulfite genome sequenc-ing,BGS)法检测ESCC细胞系中SHP-1基因启动子区CpG位点的甲基化频率,甲基化特异性PCR(methylation specific PCR,MSP)技术检测ESCC组织和细胞中SHP-1启动子区的甲基化状态,应用双荧光素酶报告基因实验检测SHP-1启动子区CpG岛甲基化对其转录活性影响.分析ESCC组织中SHP-1甲基化状态分别与临床病理特征和SHP-1 mRNA表达的关系,对组织SHP-1甲基化水平与ESCC患者生存率进行Kaplan-Meier生存分析和Log-Rank检验.结果:5-Aza-dC处理后,SHP-1 mRNA蛋白在3种细胞株中的表达显著上调(均P<0.05),同时其启动子区的甲基化程度均明显降低(均P<0.05);应用TSA处理细胞株后,SHP-1在各细胞株中的表达情况及甲基化状态无明显改变(P>0.05);甲基转移酶处理细胞荧光素报告载体活性显著低于未处理细胞荧光素报告载体活性(P<0.05),表明SHP-1的甲基化可抑制自身的转录.ESCC组织中启动子区的甲基化率明显高于癌旁组织(P<0.05),并与TNM分期、病理分级及淋巴结转移密切有关(P<0.05);与癌旁组织相比,ESCC组织中SHP-1 mRNA相对表达量显著降低(P<0.05),并与启动子区甲基化有关(P<0.05);Kaplan-Meier分析显示,启动子区高甲基化与ESCC患者的不良预后有关(P<0.05).结论:ESCC组织和细胞株中SHP-1基因启动子区高甲基化状态可抑制其自身的转录活性,进而导致该基因表达沉默;SHP-1的高甲基化与ESCC患者预后不良有关,SHP-1的甲基化状态可能成为ESCC患者预后的评估指标.