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实时荧光逆转录重组酶介导的等温扩增技术检测寨卡病毒方法的建立

Development of a real-time fluorescent reverse transcription recombinase-aided amplification method for the detection of Zika virus

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资源类型:

收录情况: ◇ 统计源期刊 ◇ 中华系列

机构: [1]河北医科大学研究生学院,石家庄 050017 [2]中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所 国家卫生健康委员会医学病毒和病毒病重点实验室,北京 102206 [3]河北医科大学第四医院检验科,石家庄 050011
出处:
ISSN:

关键词: 寨卡病毒 重组酶介导的等温扩增技术 快速检测

摘要:
目的:建立一种实时荧光逆转录重组酶介导的等温扩增(reverse transcription recombinase-aided amplification,RT-RAA)技术检测寨卡病毒(Zika virus,ZIKV)的方法,以实现ZIKV的现场快速筛查及诊断。方法:通过基因组序列比对,选择ZIKV保守序列设计RT-RAA特异性引物和探针,并用系列稀释的ZIKV重组质粒与毒株核酸验证方法的灵敏性与重复性,通过检测登革病毒、基孔肯雅病毒、西尼罗病毒等其他虫媒病毒验证方法的特异性。结果:建立的RT-RAA方法可在39 ℃恒温条件下30 min内对ZIKV进行高效扩增,检测系列稀释的ZIKV重组质粒,其95%检测限可达到15拷贝/反应,特异性强,与登革病毒、基孔肯雅病毒、西尼罗病毒虫媒病毒无交叉反应,且重复性好。结论:本研究建立的ZIKV的RT-RAA等温扩增方法,具有反应迅速,无需精密仪器,操作简单等优点,适合于应急快速检测。

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第一作者:
第一作者机构: [1]河北医科大学研究生学院,石家庄 050017
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