目的 利用RNA干扰技术抑制人食管癌细胞中RNF2基因表达,观察其X线照射对细胞增殖活性、迁移能力、凋亡和细胞周期的影响.方法 培养人食管癌细胞ECA-109,RT-PCR检测RNF2 mRNA水平表达;MTT法检测ECA-109食管癌细胞细胞增殖;蛋白印迹法检测ECA-109-R细胞中RNF2蛋白表达变化;流式细胞技术检测照射后不同时间细胞周期和凋亡变化.Transwell侵袭小室模型检测转染对食管癌细胞迁移能力的影响.重复测量设计资料方差分析.结果 照射组食管癌细胞中RNF2 在mRNA水平和蛋白表达水平均较未照射组明显增加(P<0.01),且存在剂量-效应关系;MTT结果显示食管癌细胞的增殖水平在照射后不同时间点均明显降低(P<0.01);ECA-109-R组细胞中BMI1、RNF2蛋白表达水平较ECA-109组和ECA-109-N组细胞明显降低(P<0.01),ECA-109组与ECA-109-N组比较差异无统计学意义(P>0.05);Transwell侵袭小室模型检测结果显示照射后3.5 h ECA-109-R组穿膜细胞数明显低于ECA-109组和ECA-109-N组(P<0.01).6 Gy照射后各实验组处于G2+M期比例明显高于相应未照射组(P<0.01),且ECA-109-R组处于G2+M期的比例均明显低于照射后的ECA-109组和ECA-109-N组(P<0.05).照射后ECA-109-R组细胞凋亡率明显高于ECA-109组和ECA-109-N组(P<0.01).结论 采用RNA干扰技术降低食管癌细胞中RNF2的表达,降低细胞增殖和迁移能力,解除照射后G2+M期阻滞,促进细胞凋亡,增加放射敏感性.
基金：
国家自然科学基金(30870743)%河北省医学科学研究重点课题计划(20100416) National Natural Science Foundation of China(30870743)%Key Project of Medical Science Research in Hebei Province(20100416)
