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一种高效快速肺炎球菌多糖蛋白结合疫苗纯化方法的建立

An effective and rapid purification method for pneumococcal capsular polysaccharide-protein conjugate vaccine

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资源类型:

收录情况: ◇ 统计源期刊 ◇ CSCD-E

机构: [1]河北医科大学第四医院肿瘤内科,河北石家庄,050011 [2]河北佑仁生物科技有限公司,河北石家庄,050035
出处:
ISSN:

关键词: 肺炎球菌多糖 载体蛋白 结合疫苗 纯化 免疫原性

摘要:
目的 建立一种高效快速肺炎球菌多糖蛋白结合疫苗CPS9V-CRM197的纯化方法.方法 将9V型肺炎球菌多糖(CPS9V)与载体蛋白(CRM197)通过胺还原法进行偶连结合,制备成多糖蛋白结合物CPS9V-CRM197.通过超滤及阴离子层析两步法纯化后,经皮下免疫BALB/c小鼠,5μg/只,首次免疫后14 d进行第2次免疫.于末次免疫后0、7、14、21 d经颈动脉采血,分离血清,ELISA法检测血清中的IgG及IgM抗体滴度.结果 纯化的CPS9V-CRM197结合物纯度达100%,多糖的总回收率为95%,分子半径为8.4nm,CL-4B色谱洗脱体积为50.32 ml,酶解敏感性高于载体蛋白CRM197.末次免疫后7、14、21 d时,CPS9V-CRM197免疫小鼠血清中IgG及IgM的滴度均明显高于CPS9V组(P<0.05).结论 本实验建立的肺炎多糖结合物两步纯化法具有高效、快速等优点,可用于进一步提高实际工业化生产中的生产效率.

语种:
第一作者:
第一作者机构: [1]河北医科大学第四医院肿瘤内科,河北石家庄,050011
通讯作者:
推荐引用方式(GB/T 7714):

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