资源类型:
收录情况:
◇ 北大核心
◇ CSCD-E
◇ 中华系列
文章类型:
机构:
[1]河北医科大学第四医院乳腺中心,石家庄,050011
临床科室
外一科
河北医科大学第四医院
[2]哈里逊国际和平医院普外科,河北衡水,053000
[3]河北医科大学第四医院心脏外科,石家庄,050011
临床科室
心外科
河北医科大学第四医院
[4]河北省老年病医院泌尿外科,石家庄,050011
出处:
ISSN:
关键词:
异黏蛋白基因转染
紫杉醇
抑制率
凋亡率
药物敏感性
摘要:
目的 观察异黏蛋白(MTDH)基因转染乳腺癌细胞上调和沉默前后对紫杉醇药物敏感性的影响.方法 通过RNA 干扰(RNAi)的方法使高表达MTDH细胞株人乳腺癌细胞MCF-7/ADR MTDH基因沉默,同时通过脂质体转染法对MTDH低表达细胞株人乳腺癌细胞MDA-MB-231进行MTDH基因转染;实时定量聚合酶链反应(Real-time PCR)和Western blot验证两种细胞株的沉默及转染效果,噻唑蓝(MTT)比色法绘制两种细胞株转染前后的生长曲线及对紫杉醇药物敏感性的影响,流式细胞术测定紫杉醇作用转染前后乳腺癌细胞的凋亡.结果 MTDH-小干扰RNA(siRNA)-2为沉默效果最佳的siRNA;Real-time PCR及Western blot结果显示,使MCF-7/ADR细胞MTDH基因沉默后MTDH mRNA和蛋白表达水平分别为1.026±0.126、0.227±0.021和1.419±0.012、0.037 ±0.013(P <0.05),证明MTDH沉默成功;而转染高表达MTDH质粒进入MDA-MB-231后,MTDH mRNA和蛋白表达水平分别为1.00 ±0.00、3.25 ±0.02和0.48 ±0.07、1.27 ±0.08(P<0.05),证明转染成功;噻唑蓝(MTT)显示沉默MTDH后使MCF-7/ADR细胞增殖受到明显抑制,同时沉默前后8 mg/L的紫杉醇在24 h对MCF-7/ADR的抑制率分别为(40.72±3.11)%和(70.44±3.84)%(P<0.05),凋亡率分别为(1.36±0.14)%和(17.21±1.35)%(P<0.05);MTDH基因转染后对MDA-MB-231细胞增殖起到促进作用,同时转染前后8 mg/L的紫杉醇在24 h对MDA-MB-231细胞的抑制率分别为(58.00±0.38)%和(40.52±0.03)%(P<0.05),凋亡率分别为(24.88±0.37)%和(13.97±0.50)%(P<0.05).结论 MTDH基因对乳腺癌细胞的增殖具有促进作用,MTDH基因高表达可能与降低乳腺癌细胞对紫杉醇药物的敏感性有关.
基金:
河北省自然科学基金(H2012206169);吴阶平医学基金会临床科研专项基金(320.6750.13295)
第一作者:
第一作者机构:
[1]河北医科大学第四医院乳腺中心,石家庄,050011
通讯作者:
推荐引用方式(GB/T 7714):
张东红,王勇,王新乐,等.乳腺癌异黏蛋白的表达对紫杉醇药物敏感性的影响[J].中华实验外科杂志.2016,33(4):900-903.