目的：研究Gli抑制剂GANT61对人食管腺癌细胞OE19和OE33的生长抑制作用及其可能作用机制。方法常规培养OE19和OE33细胞。MTS法检测不同浓度GANT61（30、20、13.3333、8.8888、5.9259、3.9506、2.6337、1.7558、1.1705μmol/L）对OE19和OE33细胞活力的影响，以半数抑制浓度（IC50）表示。OE19和OE33细胞分别设治疗组（10μmol/L GANT61处理）和DMSO组（常规DMSO处理）。实时荧光定量PCR检测2组OE19和OE33细胞中Gli1和Gli2 mRNA的表达。Western blot法检测2组OE19和OE33细胞的Gli1、Gli2和CyclinD1蛋白表达量的变化。Transwell侵袭实验观察2组OE19和OE33细胞24 h侵袭能力的变化。结果 GANT61作用于OE19和OE33细胞72 h的IC50值分别是8.08和9.65μmol/L。治疗组OE19和OE33细胞的Gli1、Gli2 mRNA和蛋白表达水平均低于DMSO组，CyclinD1蛋白表达水平较DMSO组亦显著降低（P＜0.05）。治疗组在OE19和OE33细胞中的穿膜细胞数较DMSO组明显减少（P＜0.01）。结论 GANT61可以通过下调Gli1和Gli2 mRNA及蛋白水平的表达，抑制食管腺癌细胞的生长和侵袭；Hedgehog信号转导通路异常活化和食管腺癌的发生和发展有关。