摘要：
目的 探讨99Tcm标记人表皮生长因子受体2(HER2)小分子靶向结合蛋白ZHER2:342的制备方法,分析其在体外与HER2的结合特性.方法 利用配体交换法进行ZHER1:342的99Tcm标记,分析不同质量的SnC12和NaOH、不同反应时间对标记率的影响,探讨最佳的标记方法.用HPLC测定标记物的标记率与放化纯,并分析其体外稳定性.分析标记物在体外与HER2高表达的人卵巢癌SKOV-3细胞的结合率及滞留率,并与HER2低表达的人乳腺癌MDA-MB-231细胞进行对比.在体外用过量未标记的ZHER2:342对SKOV-3细胞HER2进行封闭后,与未封闭组进行对比,研究该分子探针与HER2结合的特异性.采用单因素方差分析及两样本t检验分析数据.结果 99Tcm标记ZHER2:342的最佳条件为:反应体系中依次加入ZHER2:342 5μg(1 g/L)、NaOH 5 μg(1 g/L)、SnCl2 8.8μg(1 g/L)、99TcmO:150μl(37 MBq),轻微振荡后室温静置1h.99Tcm-ZHER2:342标记率为(98.10±1.73)％,放化纯＞98％;体外稳定性好,与生理盐水及新鲜人血清混合24h后放化纯均＞85％.在体外与HER2高表达的SKOV-3细胞具有较高的结合率,混合后6h最高,结合率为(9.95±1.02)％,且各时间点细胞结合率均明显高于HER2低表达的MDA-MB-231细胞(5.68～9.88与0.56～2.11;t=-34.50～-13.14,均P＜0.01).此外,加入过量的未标记的ZHER2:342进行受体封闭时,99Tcm-ZHER2:342与SKOV-3细胞的结合率从(9.95±1.02)％降到(2.11±0.27)％(t=-13.14,P＜0.01).结论 99Tcm标记ZHER2:342方法简单,标记率高;标记产物体外稳定性好,在体外可与HER2高表达的人卵巢癌SKOV-3细胞特异性结合,是有潜力的HER2靶向分子影像探针.
