摘要:
目的 观察丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)信号通路在肝细胞生长因子(HGF)促进人结肠癌细胞SW620增殖、移行中的作用.方法 在细胞培养液中加入MAPK通路中丝裂原细胞外激酶(MEK1/2)的拮抗剂U0126(终质量浓度分别为0.5、1.0、2.0、4.0、8.0 μmol/L),之后加入终质量浓度为20 μg/L的HGF.用噻唑蓝(MTT)比色法检测SW620细胞增殖,流式细胞术检测细胞周期,划痕试验检测移行.二甲基亚砜(DMSO)组加终质量浓度为0.1%体积浓度的DMSO,加入同体积的培养液作为对照组.结果 (1) U0126与20 μg/L HGF共同作用SW620细胞48 h后,低浓度(0.5、1.0、2.0 μmol/L)U0126组、DMSO组与对照组之间比较差异无统计学意义(P>0.05),当U0126浓度≥4.0μmol/L时能抑制HGF促SW620增殖,但未表现出浓度依赖性.4.0、8.0 μmol/LU0126组增殖抑制率分别为24.6%和28.4% (P <0.05).(2)2.0、4.0、8.0 μmol/L U0126组G1期细胞数增多,而S期细胞数减少,3组的增殖指数(32.32±6.64、23.87±4.88、20.28±5.22)均低于对照组,P<0.05),且4.0、8.0μmol/L U0126组与2.0 μmol/L组差异有统计学意义(P<0.05).(3)加入U0126 24 h后,仅8.0μmol/L组SW620细胞移行受到明显抑制,抑制率为60.9%(P<0.05),DMSO组、4.0mol/L U0126组与对照组移行距离差异无统计学意义(P >0.05);48、72 h后,8.0 μmol/L和4.0μmol/L U0126组细胞移行均受到抑制(P<0.05),48 h抑制率分别为46.5%、61.8%,72 h抑制率分别为44.2%、54.3%,但8.0μmol/L组与4μmol/L组细胞移行距离差异无统计学意义(P>0.05).结论 MAPK信号通路参与了HGF促人结肠癌细胞SW620增殖和移行的作用.