摘要:
目的:探讨细胞因子诱导的杀伤细胞( cytokine-induced killer cell,CIK)对荧光素酶标记的人官颈癌HeLa-luc细胞的体内外抗肿瘤作用,了解CIK回输荷瘤小鼠后在不同器官的分布特点.方法:由健康志愿者外周血单个核细胞体外诱导培养CIK,流式细胞术检测CIK表面分子的表达,RT-PCR法检测IFN-γmRNA的表达,MTT法和瑞氏-姬姆萨染色测定CIK对HeLa-luc细胞的杀伤作用.建立荷HeLa-luc瘤BALB/c裸鼠模型,体内成像系统观察荷瘤小鼠肿瘤大小变化及CIK治疗效果,共聚焦显微镜观察不同器官中CIK的分布情况.结果:CIK在体外诱导培养14 - 21 d,其生长达到高峰,此时CD3+CD56+T细胞的比例增加50倍以上,IFN.-γ mRNA表达水平也达到高峰.在效靶比为20∶1、40∶1时,CIK对HeLa-luc细胞的杀伤率分别为(51.16±2.64)%、(72.14±4.21)%,明显高于对照组的(16.33±3.09)%、(21.26±2.71)%(P<0.05).CIK治疗5周和8周后,对荷瘤小鼠的抑瘤率分别为47.18%、64.38%.CIK治疗组荷瘤小鼠外周血中IFN-γ水平为(61.92±6.49) pg/ml,明显高于对照组的(34.30±1.78) pg/ml(P <0.05).CFSE标记的CIK经腹腔和瘤旁注射入荷瘤小鼠3h,在肺、肝、脾、外周血、肿瘤中均可观察到绿色荧光;腹腔途径注射24h时,肿瘤组织中CIK浓度达到高峰(20.56±1.72)%;瘤旁途径注射3h时,肿瘤组织中CIK达到高峰(25.75±3.45)%.结论:CIK在体内外对宫颈癌HeLa-luc细胞均有较强的杀伤作用,CIK经不同途径注射荷瘤小鼠后可以广泛分布于全身器官,其到达各脏器的浓度与输注途径及时间密切相关.