资源类型:
收录情况:
◇ 北大核心
◇ CSCD-C
文章类型:
机构:
[1]河北医科大学基础医学院免疫学教研室,石家庄,050017
[2]河北医科大学第四医院检验科,石家庄,050011
医技科室
检验科
河北医科大学第四医院
[3]白求恩国际和平医院检验实验中心,石家庄,050082
[4]河北医科大学第四医院科研中心,石家庄,050011
医技科室
科研中心
河北医科大学第四医院
出处:
ISSN:
关键词:
白细胞介素17
转染
乳腺肿瘤
摘要:
目的 建立稳定转染小鼠IL-17基因全长的小鼠乳腺癌4T1细胞株,并进行鉴定.方法 脂质体法将携带小鼠IL-17基因全长的真核表达载体pcDNA3.1转染小鼠乳腺癌细胞4TI,经G418筛选出稳定表达IL-17的细胞株;镜下观察细胞形态,RT-PCR法、Western印迹和激光共聚焦法检测目的 基因和蛋白的表达;收集转染和未转染IL-17的4T1细胞的培养上清,分别与巨噬细胞RAW264.7共培养,ELISA法检测RAW264.7细胞培养上清中IL-6水平;MTS法检测细胞的增殖情况,流式细胞技术检测细胞周期、凋亡以及细胞表面MHC I、MHCⅡ、淋巴细胞功能相关抗原-1(LFA-1)等分子表达.结果 获得1株稳定表达IL-17的4T1细胞,而且其培养上清可刺激小鼠巨噬细胞RAW264.7产生IL-6,证明该细胞可表达功能性IL-17.结论 成功建立了稳定转染IL-17基因的小鼠乳腺癌细胞株.
基金:
河北省自然科学基金资助项目(C2010000474)%河北普通高等学校强势特色学科建设课题项目
第一作者:
第一作者机构:
[1]河北医科大学基础医学院免疫学教研室,石家庄,050017
通讯作者:
推荐引用方式(GB/T 7714):
杨丽娟,赵莎,张海谱,等.稳定转染小鼠IL-17全长基因的乳腺癌细胞株的建立及基因转染对4T1细胞的影响[J].军事医学.2012,36(08):603-607.