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稳定转染小鼠IL-17全长基因的乳腺癌细胞株的建立及基因转染对4T1细胞的影响

Construction of a transfected breast cancer cell line expressing mouse IL-17 and effect of gene transfection on 4T1 cell

文献详情

资源类型:

收录情况: ◇ 北大核心 ◇ CSCD-C

机构: [1]河北医科大学基础医学院免疫学教研室,石家庄,050017 [2]河北医科大学第四医院检验科,石家庄,050011 [3]白求恩国际和平医院检验实验中心,石家庄,050082 [4]河北医科大学第四医院科研中心,石家庄,050011
出处:
ISSN:

关键词: 白细胞介素17 转染 乳腺肿瘤

摘要:
目的 建立稳定转染小鼠IL-17基因全长的小鼠乳腺癌4T1细胞株,并进行鉴定.方法 脂质体法将携带小鼠IL-17基因全长的真核表达载体pcDNA3.1转染小鼠乳腺癌细胞4TI,经G418筛选出稳定表达IL-17的细胞株;镜下观察细胞形态,RT-PCR法、Western印迹和激光共聚焦法检测目的 基因和蛋白的表达;收集转染和未转染IL-17的4T1细胞的培养上清,分别与巨噬细胞RAW264.7共培养,ELISA法检测RAW264.7细胞培养上清中IL-6水平;MTS法检测细胞的增殖情况,流式细胞技术检测细胞周期、凋亡以及细胞表面MHC I、MHCⅡ、淋巴细胞功能相关抗原-1(LFA-1)等分子表达.结果 获得1株稳定表达IL-17的4T1细胞,而且其培养上清可刺激小鼠巨噬细胞RAW264.7产生IL-6,证明该细胞可表达功能性IL-17.结论 成功建立了稳定转染IL-17基因的小鼠乳腺癌细胞株.

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第一作者:
第一作者机构: [1]河北医科大学基础医学院免疫学教研室,石家庄,050017
通讯作者:
推荐引用方式(GB/T 7714):

资源点击量:39770 今日访问量:0 总访问量:1333 更新日期:2025-05-01 建议使用谷歌、火狐浏览器 常见问题

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