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小鼠IL-23基因的克隆和在逆转录病毒中的表达

Cloning of the Mouse IL-23 Gene and Its Expression in Retrovirus

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收录情况: ◇ 北大核心

机构: [1]河北医科大学第四医院科研中心,河北省肿瘤基因诊断、预防和治疗重点实验室,石家庄,050011
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关键词: 逆转录病毒载体 IL-23 基因表达 包装细胞

摘要:
从肿瘤组织(含有活化的淋巴细胞)提取总RNA,经逆转录多聚酶链反应(RT-PCR)获得小鼠IL-23 cDNA.经DNA测序分析,证实该片段与GeneBank记载的IL-23 cDNA序列一致.将该目的基因插入LXSN逆转录病毒载体,并转染大肠杆菌DH5α中扩增,再感染ф2(ecotropic)和PA317(amphotropic)两种包装细胞,经G418筛选后获得表达IL-23分子的PA317阳性细胞克隆.通过用PCR、RT-PCR及Northern blot技术检测目的基因表达,结果表明,成功地将鼠IL-23 cDNA插入逆转录病毒载体,经转染两种包装细胞产生了高表达IL-23的PA317细胞克隆.该克隆细胞产生的逆转录病毒可进一步用于转染肿瘤细胞,为制备肿瘤疫苗奠定了基础.

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第一作者:
第一作者机构: [1]河北医科大学第四医院科研中心,河北省肿瘤基因诊断、预防和治疗重点实验室,石家庄,050011
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资源点击量:39767 今日访问量:0 总访问量:1333 更新日期:2025-05-01 建议使用谷歌、火狐浏览器 常见问题

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