摘要:
目的探讨白藜芦醇(Resveratrol,RES)通过降低氧化应激改善过氧化氢(Hydrogen peroxide,H2O2)诱导的精子活力和DNA损伤。方法收集我院生殖医学科精液检查正常标本,采用Percoll密度梯度离心法进行处理,处理后调整精子浓度为20×106/ml放置在5%CO2,37℃培养箱。不同浓度(0、25、50、75、100μmol/L) H2O2处理24 h,通过前向运动精子和总活力精子筛选H2O2浓度,建立H2O2精子损伤模型。进一步用不同浓度(0、10、25、50、75、100μmol/L)RES和H2O2共同作用24 h,通过前向运动精子和总活力精子选择RES浓度。根据上述确定RES和H2O2浓度,将实验分为三组:对照组(CON)、H2O2组(H2O2)、H2O2+RES组(RES+H2O2),对三组精子处理后用伊红-苯胺黑染色检测精子膜完整性,硫代巴比妥酸法(TBA)测定MDA水平,精子吖啶橙染色检测精子DNA损伤。结果随H2O2浓度增加,前向运动精子和总活力精子降低,呈剂量依赖关系,选定100μmol/L H2O2为后续实验药物浓度。在H2O2精子损伤模型中随RES浓度增加,前向运动精子和总活力精子增加,50μmol/L RES对精子损伤改善效果最佳,确定为后续实验药物浓度。三组结果显示:H2O2组与CON组相比精子膜完整性降低,MDA水平上升,精子DNA损伤增加,而H2O2+RES组与H2O2组相比精子膜完整性提高,MDA水平下降,精子DNA损伤降低。结论RES可降低H2O2导致精子氧化损伤。