目的 探讨ARL5B在食管癌组织和细胞中的表达及对放疗敏感性的影响，并初步探索其潜在机制。方法 收集2021-03-01-2022-03-01河北医科大学第四医院胸外科行手术且经病理确诊的30例食管癌患者癌组织和癌旁组织（距离癌组织3～5 cm）。实时荧光定量逆转录-聚合酶链反应（qRT-PCR）和蛋白质印迹实验检测食管癌组织，食管癌细胞系TE-1、ECA-109、EC-9706及正常食管上皮细胞系HEEC中ARL5B mRNA和蛋白表达。体外培养食管癌细胞株，转染ARL5B干扰慢病毒载体（ARL5B-siRNA）和ARL5B过表达慢病毒载体（oeARL5B）,建立ARL5B抑制（分为ARL5B-siRNA组、NC-siRNA组和TE-1空白组）及过表达模型（分为oeARL5B组、NC-Vector组和EC-9706空白组）。给予4 Gy剂量X射线照射细胞建立放疗模型，分为ARL5B-siRNA放疗组、oeARL5B放疗组和TE-1空白放疗组。细胞计数试剂盒（CCK8）检测各组细胞的活性；划痕实验和Transwell小室实验检测各组细胞的迁移侵袭能力；qRT-PCR法检测增殖细胞核抗原（PCNA）、Cyclin D1、p16、基质金属蛋白酶2（MMP2）、MMP7以及基质金属蛋白酶抑制剂（TIMP1） mRNA在各组细胞中表达情况；蛋白质印迹实验检测蛋白水平表达。结果 食管癌组织中ARL5B mRNA（Z=-6.653,P＜0.001）和ARL5B蛋白表达水平（Z=-3.460,P=0.001）均高于癌旁组织。食管癌细胞株TE-1、ECA-109、EC-9706及正常食管细胞株HEEC中ARL5B mRNA（F=40.733,P＜0.001）和ARL5B蛋白表达水平（F=36.382,P＜0.001）差异均有统计学意义。构建ARL5B抑制模型后，TE-1空白组、NC-siRNA组和ARL5B-siRNA组ARL5B mRNA（F=129.701,P＜0.001）和ARL5B蛋白表达水平（F=26.272,P=0.001）差异均有统计学意义。构建ARL5B过表达模型后，EC-9706空白组、NC-vector组和oeARL5B组ARL5B mRNA（F=13.145,P＜0.001）和ARL5B蛋白表达水平（F=8.924,P=0.016）差异均有统计学意义。放射线照射处理后24、48和72 h, 6组细胞活性由高到低分别为oeARL5B组、TE-1空白组、oeARL5B放疗组、ARL5B-siRNA组、TE-1空白放疗组、ARL5B-siRNA放疗组，F值分别为21.235、38.832和20.165,均P＜0.001。TE-1空白组、NC-siRNA组和ARL5B-siRNA组迁移率（F=27.737,P＜0.001）和穿膜细胞数（F=27.737,P＜0.001）差异有统计学意义。EC-9706空白组、NC-Vector组和oeARL5B组迁移率（F=33.745,P＜0.001）和穿膜细胞数（F=35.052,P＜0.001）差异有统计学意义。qRT-PCR结果显示，与TE-1空白组及NC-siRNA组相比，ARL5B-siRNA组细胞PCNA、Cyclin D1、MMP2、MMP7 mRNA和蛋白表达降低，而p16、TIMP1 mRNA和蛋白表达升高，均P＜0.05;与EC-9706空白组和NC-Vector组相比，oeARL5B组细胞PCNA、Cyclin D1、MMP2、MMP7 mRNA和蛋白表达降低，而p16 mRNA和蛋白表达升高，均P＜0.05。结论 ARL5B过表达可能是食管癌放疗抵抗形成的分子基础之一，抑制ARL5B表达可逆转食管癌的放疗抵抗特性，改善食管癌放疗效果。