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活化T细胞核因子c1在慢性肾衰竭大鼠血管钙化中的作用

Role of nuclear factor of activated T-cells cytoplasmic 1 on vascular calcification in rats with chronic renal failure

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资源类型:

收录情况: ◇ 统计源期刊 ◇ 北大核心 ◇ CSCD-C ◇ 中华系列

机构: [1]河北医科大学第四医院肾内科,石家庄,050011
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关键词: NFATC转录因子类 钙质沉着症 平滑 血管 肾功能衰竭 慢性 核心结合因子α1亚基

摘要:
目的 探讨活化T细胞核因子c1(NFATc1)在慢性肾衰竭大鼠血管钙化中的作用.方法 将19只雄性SD大鼠随机分为3组:假手术组6只(甲基纤维素灌胃)、慢性肾衰竭组6只(5/6肾切除+甲基纤维素灌胃)、慢性肾衰竭血管钙化组7只(5/6肾切除+甲基纤维素灌胃+骨化三醇灌胃).采用yon Kossa染色方法和邻甲酚酞络合酮比色法测定检测大鼠主动脉钙化情况;免疫组织化学方法检测大鼠主动脉NFATc1蛋白表达情况.体外原代培养大鼠胸主动脉血管平滑肌细胞(VSMCs),用β-甘油磷酸(β-GP)诱导钙化.将细胞随机分为3组:正常对照组、钙化组(10 mmol/Lβ-GP)和环孢素A(CsA)干预组[高磷培养基基础上添加CsA(调整浓度为1μg/ml)].采用茜素红染色及邻甲酚酞络合酮比色法检测细胞钙化情况;酶联免疫吸附法检测细胞碱性磷酸酶(ALP)活性;RT-PCR和Western印迹法检测NFATc1、Runt相关转录因子2(Runx2)的表达.结果 体内实验结果显示,与假手术组和慢性肾衰竭组相比,慢性肾衰竭血管钙化组的大鼠主动脉NFATc1免疫组化评分较高(7.20±0.46比1.52±0.77、2.04±1.31,均P<0.05).体外实验结果显示,高磷环境成功诱导了VSMCs钙化发生;RT-PCR和Western印迹结果显示钙化组VSMCs的NFATc1和Runx2表达高于正常对照组(均P<0.05);CsA干预后VSMCs钙盐沉积减少[(60.86±7.95)比(107.20±11.07) mg/g,P<0.05],Runx2表达(mRNA和蛋白水平)及ALP活性亦降低[(48.63±3.02)比(98.75±3.46) U/g,P<0.05].结论 NFATc1在慢性肾衰竭大鼠血管钙化发生中可能起促进作用,其作用机制可能与促进VSMCs成骨样表型转化有关.

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第一作者机构: [1]河北医科大学第四医院肾内科,石家庄,050011
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