摘要:
目的:探讨骨形成蛋白-2(Bone morphogenetic protein 2,BMP-2)在高磷诱导的大鼠胸主动脉血管环钙化中的作用.方法:选取8~10周龄健康雄性SD大鼠,体外培养大鼠胸主动脉血管环,血管环按随机数字表法随机分为2组:正常对照组和高磷组.血管环培养7d和14 d后,采用von Kossa染色及邻甲酚酞络合酮比色法检测大鼠胸主动脉血管环钙化情况;免疫组织化学方法检测血管环BMP-2的表达.体外采用组织块贴壁法培养原代大鼠胸主动脉平滑肌细胞,利用10 mmol/Lβ-甘油磷酸制备血管平滑肌细胞钙化模型,细胞随机分为2组:正常对照组、高磷组(10 mmol/L β-甘油磷酸).采用茜素红染色及邻甲酚酞络合酮比色法检测细胞钙化情况,RT-PCR和Western blot方法检测细胞培养7d和14 d的BMP-2 mRNA及蛋白表达,并观察短时间内不同时间点BMP-2蛋白表达情况.结果:体外血管环培养7d、14d后,与正常对照组相比,高磷组钙含量明显增加(P<0.05);与7d高磷组血管环钙含量相比,14 d高磷组血管环钙含量明显增加(P<0.05).免疫组织化学结果显示,与正常对照组相比,高磷组BMP-2表达增加(P<0.05);与7d高磷组相比,14 d高磷组血管环钙含量明显增加(P<0.05).细胞培养7d、14 d后,与正常对照组相比,高磷组钙盐沉积及钙含量明显增高(P<0.05);RT-PCR和Western Blot显示,与正常对照组相比,高磷组BMP-2 mRNA及蛋白表达增加.进一步动态观察BMP-2蛋白的表达变化,结果显示正常对照组及高磷组BMP-2蛋白表达随时间延长呈增强趋势(P<0.05).结论:BMP-2可能参与了高磷诱导的血管钙化的发生发展.