资源类型：
收录情况：
◇ 统计源期刊
◇ 北大核心
◇ CSCD-C
文章类型：
机构：
[1]河北医科大学基础医学院免疫学教研室,石家庄050017
[2]河北医科大学第一医院细胞治疗实验室,石家庄050031
[3]河北医科大学第四医院乳腺疾病治疗中心,石家庄050011
河北医科大学第四医院
[4]河北医科大学第一医院妇产科,石家庄050031
[5]河北医科大学第一医院内分泌科,石家庄050031
[6]河北医科大学流行病与卫生统计学教研室,石家庄050017
[7]河北医科大学护理学院,石家庄050017
出处：
ISSN：
关键词：
IFN-λ
真核表达
抗增殖
凋亡
抗病毒
摘要：
目的：构建 IFN-λ真核表达体系，检测 IFN-λ基因在真核细胞中的表达，评估真核细胞表达 IFN-λ的抗增殖和抗病毒生物学作用。方法从 poly I∶C 刺激的 HuH-7细胞 mRNA 中克隆 IFN-λ1／2基因全长，并进行 DNA 基因测序；构建 pcDNA3-IFN-λ1／2质粒，酶切鉴定，并将其转染 COS-7细胞，应用 Western 印迹检测 IFN-λ1／2在 COS-7细胞中的表达。COS-7细胞表达的 IFN-λ1／2作用于人食管癌 YES5和 T．Tn 细胞株，CCK-8法检测癌细胞增殖， Western 印迹检测凋亡蛋白 caspase-3的活化，实时荧光定量 PCR 检测 ISG15及 MxA 抗病毒基因表达。结果经PCR、DNA 测序和酶切鉴定，克隆的 IFN-λ1／2基因与 GenBank 公布的序列一致，IFN-λ1／2基因序列正确构建入pcDNA3载体中；在 pcDNA3-IFN-λ1／2转染的 COS-7细胞中检测到 IFN-λ1／2蛋白表达；其表达产物可诱导食管癌细胞增殖抑制、活化凋亡蛋白 caspase-3，并且上调抗病毒 ISG15及 MxA 基因。结论建立了 IFN-λ真核表达体系，即通过 pcDNA3-IFN-λ1／2转染 COS-7细胞实现了 IFN-λ表达；经此体系表达的 IFN-λ具有抗增殖、诱导凋亡及上调抗病毒基因表达的生物学作用；此体系的建立为 IFN-λ的生物学功能研究和临床应用奠定了基础。
基金：
国家自然科学基金资助项目(81000913)；河北省科学技术研究与发展计划资助项目(10396101D)；河北省科技计划资助项目(13397703D)；河北省应用基础研究计划重点基础研究项目(14967719D，15962704D)；河北省医学科研研究重点课题计划指导项目(20150626)
第一作者：
第一作者机构：
[1]河北医科大学基础医学院免疫学教研室,石家庄050017
[2]河北医科大学第一医院细胞治疗实验室,石家庄050031
通讯作者：
通讯机构：
[1]河北医科大学基础医学院免疫学教研室,石家庄050017
[2]河北医科大学第一医院细胞治疗实验室,石家庄050031
推荐引用方式(GB/T 7714)：
李竞,齐义新,房桂英,等.IFN-λ真核表达载体的建立及其表达产物的生物学功能评估[J].军事医学.2015,39(11):816-820.
