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文章类型：
机构：
[1]河北医科大学第四医院科研中心,河北,石家庄,050011
医技科室
科研中心
河北医科大学第四医院
出处：
ISSN：
关键词：
Syk
真核表达
乳腺癌细胞
MHC-Ⅰ
摘要：
目的:构建非受体蛋白酪氨酸激酶Syk的真核表达载体,转染人乳腺癌细胞,使其在细胞中稳定表达,以研究Syk对人乳腺癌细胞MHC-Ⅰ类分子表达的影响.方法:以RTPCR法从人乳腺癌细胞株MDA-MB-468扩增出syk编码序列基因片段,将其克隆到真核表达载体pcDNA3.1D/V5-His-TOPO中.对重组质粒进行酶切、PCR及测序鉴定后,以脂质体介导法转染Syk缺失的人乳腺癌细胞MDA-MB-231,经G418筛选,构建syk基因稳定表达的细胞株,通过Western blot、RT-PCR和流式细胞术检测转染乳腺癌细胞Syk、MHC-Ⅰ及ICAM-Ⅰ的表达.结果:构建了hsyk真核表达载体pcDNA3.1D/V5-His-TOPO/hsyk,并在人乳腺癌细胞MDA-MB-231中获得稳定表达.表达Syk的MDA-MB-231细胞同时可以高表达MHC-Ⅰ和ICAM-Ⅰ.结论:成功地构建了syk真核表达载体并在真核细胞中表达,为进一步的肿瘤免疫研究奠定了实验基础.
PubmedID：
第一作者：
第一作者机构：
[1]河北医科大学第四医院科研中心,河北,石家庄,050011
推荐引用方式(GB/T 7714)：
单保恩,宋小天,齐义新.syk真核表达载体的构建及其对人乳腺癌细胞MHC-Ⅰ类分子表达的影响[J].细胞与分子免疫学杂志.2008,24(1):3-5.
