资源类型：
收录情况：
◇ 统计源期刊
◇ 北大核心
◇ CSCD-E
文章类型：
机构：
[1]河北医科大学第四医院科研中心 河北省肿瘤研究所免疫室,石家庄050011
临床科室
医技科室
河北省肿瘤研究所
科研中心
河北医科大学第四医院
[2]河北省肿瘤基因诊断、预防和治疗重点实验室
出处：
ISSN：
关键词：
乳腺癌
miRNA
p65
细胞周期
摘要：
目的 研究miRNA(microRNA)沉默p65基因后对人乳腺癌细胞株MDA-MB-231细胞周期分布的影响.方法 用pcDNATM6.2-GW/EmGFP-miR载体构建p65 miRNA表达质粒,转染MDA-MB-231细胞,用RT-PCR检测转染前后各组细胞中p65 mRNA表达变化；凝胶电泳迁移率改变分析(electrophoretic mobility shift assay,EMSA)实验研究转染前后细胞中NF-κB结合活性的变化；流式细胞术(Flow cytometry,FCM)观察转染前后细胞周期分布的变化；Western blot法检测转染前后细胞周期相关因子cyclinD1、CDK4、p21蛋白表达的变化.结果 p65 miRNA质粒明显下调MDA-MB-231细胞中p65 mRNA的表达水平,并显著抑制细胞中NF-kB的结合活性(P＜0.05).FCM结果显示,转染组细胞G0/G1期细胞比例显著增加,S、G2/M期细胞比例明显下降(P＜0.05)；Western blot分析结果显示,沉默p65基因后细胞中cyclinD1蛋白表达下调,p21蛋白表达增加.结论 p65 miRNA可以显著降低p65 mRNA的表达,诱导乳腺癌细胞发生G0/G1期阻滞,可能是通过降低cyclinD1蛋白,上调p21蛋白表达而实现的.
基金：
河北省科学技术研究与发展计划资助项目(10276167)
第一作者：
第一作者机构：
[1]河北医科大学第四医院科研中心 河北省肿瘤研究所免疫室,石家庄050011
通讯作者：
通讯机构：
[1]河北医科大学第四医院科研中心 河北省肿瘤研究所免疫室,石家庄050011
[2]河北省肿瘤基因诊断、预防和治疗重点实验室
推荐引用方式(GB/T 7714)：
王玲,赵连梅,张超,等.沉默p65基因对人乳腺癌细胞MDA-MB-231细胞周期的影响[J].肿瘤防治研究.2011,38(11):1236-1240.
