摘要:
目的 建立同时检测肠杆菌科细菌超广谱β内酰胺酶(ESBLs)和AmpC β内酰胺酶(AmpCs)的头孢噻肟平板试验(CTX-AM)方法.方法 将已水化的空白、克拉维酸(CLV 10 μg)、氯唑西林(CLX 300 μg)和CLV/CLX(10/300 μg)纸片间隔一定距离贴于已接种大肠埃希菌ATCC25922的头孢噻肟(CTX,0.5 μg/ml)-MH平板和头孢他啶(CAZ,1 μg/ml)-MH平板上,并将待检菌数个菌落涂于各纸片中央,35 ℃过夜培养,根据各纸片周围细菌生长情况判定β内酰胺酶的类型.以肺炎克雷伯菌ATCC 700603、阴沟肠杆菌029M和大肠埃希菌ATCC25922作质控,并与双纸片增效试验(DDET)和酶粗提物三维试验(TDEM)进行方法学比对.结果 CTX-AM试验对58株肠杆菌科细菌进行检测,检出产AmpCs的菌株与TDEM试验完全一致;CTX-AM试验检出同时产ESBLs和AmpCs的5株菌中,DDET 2株ESBLs阴性;且CTX-AM识别的1株产耐酶抑制剂β内酰胺酶的菌株和3株产其他β内酰胺酶的菌株,DDET试验未能识别.结论 CTX-AM试验操作简便、结果易于判读、成本低廉,在一块平板上即可完成对ESBLs和AmpCs的检测,适于各级临床微生物实验室常规应用.