摘要:
目的探索洛铂在结肠癌细胞中的抗肿瘤活性,阐明潜在分子机制,为临床应用提供理论证据。方法体外培养结肠癌细胞SW480,用MTT比色法和克隆形成实验检测不同浓度的洛铂分别处理结肠癌SW480细胞株24、48 h和72 h后,对结肠癌细胞增殖活性的抑制作用;用流式细胞仪检测不同浓度梯度的洛铂对结肠癌SW480细胞株凋亡率的影响;采用Western blot检测洛铂对SW480细胞凋亡相关蛋白CASPASE-3、BAD、BCL-2的表达;添加AKT抑制剂及激动剂,采用Western blot检测CASPASE3、AKT、p AKT、BAD、p-BAD和BCL-2表达量,探讨洛铂促结肠癌细胞凋亡的作用机制。结果洛铂能显著抑制体外培养的SW480细胞的生长,呈现为时间剂量依赖型;洛铂可诱导结肠癌SW480细胞凋亡,且随着洛铂浓度的增加,结肠癌SW480细胞凋亡率显著提高,结果具有统计学意义。洛铂可下调结肠癌细胞抑凋亡基因BCL-2蛋白表达,上调促凋亡基因BAD和CASPASE-3蛋白表达量;添加AKT抑制剂MK-2206后,pAKT、p-BAD和BCL-2蛋白表达显著降低,CASPASE3蛋白表达显著升高,促进了细胞凋亡,结果具有统计学差异。添加AKT激动剂SC97处理后,pAKT、p-BAD和BCL-2蛋白表达显著上调,CASPASE3蛋白表达显著下调,抑制了细胞凋亡,结果具有统计学意义。结论洛铂能显著抑制人结肠癌SW480细胞增殖,诱导癌细胞凋亡,洛铂可能通过AKT/BCL-2/BAD信号通路发挥促细胞凋亡作用,是一种有效的抗结肠癌药物。