目的 观察溶酶体相关跨膜蛋白4B（LAPTM4B）在非小细胞肺癌（non-small cell lung canncer,NSCLC）不同基因突变状态下的表达,探究LAPTM4B在EGFR-TKIs耐药中的作用。方法 收集464例细胞学标本,其中31例为EGFR-TKIs靶向治疗后继发耐药基因T790M突变的标本,离心沉淀制成细胞块,经HE及免疫细胞化学染色确诊为NSCLC,应用实时荧光定量PCR法联合检测多基因（EGFR、ALK、ROS1、RET、KRAS、BRAF、HER-2、NRAS、PIK3CA、c-MET）突变状态;免疫细胞化学染色检测不同基因改变状态下LAPTM4B的表达。收集EGFR-TKIs治疗前的31例标本及配对的EGFR-TKIs治疗后继发耐药基因T790M突变标本,对比分析继发耐药基因T790M突变前后LAPTM4B的表达变化。结果 464例NSCLC细胞学标本进行多基因突变联合检测,结果示单基因突变365例（78.7%）、双基因伴随突变14例（3%）、野生型85例（18.3%）,阳性率为81.7%。单基因EGFR、ALK、ROS1、RET、KRAS、BRAF、HER-2、NRAS、c-MET突率分别为59%、6%、3%、2%、4%、2%、2%、0.2%、1%;双基因伴随EGFR+PIK3 CA、ALK+KRAS、EGFR+BRAF、EGFR+HER-2、EGFR+RET、EGFR+KRAS、RET+HER-2突变率分别为1%、0.4%、0.4%、0.4%、0.4%、0.2%、0.2%。LAPTM4B蛋白表达与患者性别、年龄无关,与肿瘤分化程度呈正相关（P ＜0.001）,差异有统计学意义。LAPTM4B蛋白表达与基因突变及EGFR基因突变密切相关,差异有统计学意义（P ＜0.05）;与K-RAS等基因突变无关。基因突变型病例相对于基因野生型病例,LAPTM4B蛋白表达增高的风险增加（OR=2.94,95%CI:1.804～4.791）。31例EGFR-TKIs继发耐药基因T790M突变NSCLC标本的LAPTM4B蛋白表达水平高于EGFR-TKIs治疗前标本,差异有统计学意义（P＜0.05）。结论 LAPTM4B蛋白表达水平与NSCLC肿瘤分化程度及EGFR基因突变相关。LAPTM4B在EGFR-TKIs继发耐药基因T790M突变时表达增加,可能是EGFR-TKIs继发耐药产生的机制。