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微小RNA-9-5p通过靶向作用于亮氨酸拉链肿瘤抑制因子2对三阴性乳腺癌细胞侵袭能力的影响

MicroRNA-9-5p exerts its effects on the invasive ability of triple-negative breast cancer cells by targeting leucine zipper tumor suppressor 2

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资源类型:

收录情况: ◇ 统计源期刊 ◇ 北大核心 ◇ 中华系列

机构: [1]河北医科大学第二医院整形外科,石家庄050000 [2]河北医科大学第二医院普通外科,石家庄050000 [3]河北医科大学第四医院乳腺外科,石家庄050011 [4]山东省潍坊市人民医院超声科,潍坊261000
出处:
ISSN:

关键词: 微小RNA 三阴性乳腺癌 侵袭

摘要:
目的:观察三阴性乳腺癌(TNBC)细胞中微小RNA(miRNA,miR)-9-5p对亮氨酸拉链肿瘤抑制因子2(LZTS2)的调控作用,及其对三阴性乳腺癌细胞侵袭能力的影响。方法:收集30例2019年4月至2020年4月期间河北医科大学第四医院乳腺外科三阴性乳腺癌及癌旁标本。采用实时荧光定量聚合酶链反应(PCR)方法检测三阴性乳腺癌组织中miR-9-5p及LZTS2基因的表达水平;将MDA-MB-231细胞分为阴性对照组及miR-9-5p模拟物组,采用双荧光素酶报告基因实验分析LZTS2是否为miR-9-5p靶基因;再将MDA-MB-231细胞分为阴性对照组及miR-9-5p抑制剂组,采用蛋白印迹实验检测miR-9-5p对LZTS2蛋白表达的影响;采用细胞侵袭实验检测miR-9-5p抑制剂对细胞侵袭能力的影响;随后,将MDA-MB-231细胞分为miRNA阴性对照+空载体组及miR-9-5p模拟物+LZTS2组,利用细胞侵袭实验分析miR-9-5p对细胞侵袭能力的影响是否与LZTS2表达有关,两组间比较采用 t检验。 结果:实时荧光定量PCR结果表明miR-9-5p在三阴性乳腺癌组织中表达(4.45±0.68)明显高于癌旁组织(1.02±0.07, t=8.691, P<0.05);LZTS2在三阴性乳腺癌组织中的表达(0.35±0.11)明显低于癌旁组织(1.01±0.05, t=9.365, P<0.05);相关性分析结果发现miR-9-5p与LZTS2两者表达呈负相关( r=-0.472, P<0.05);报告基因分析结果表明,miR-9-5p模拟物和LZTS2 3’端非编码区(3’UTR)野生型载体共转染组报告基因活性(0.35±0.02)显著低于对照组(1.02±0.04, t=14.980, P<0.05)。蛋白印迹实验结果显示,转染miR-9-5p抑制剂组LZTS2蛋白的表达水平(1.28±0.05)明显高于阴性对照组(0.23±0.01, t=17.50, P<0.05)。细胞侵袭实验结果表明,miR-9-5p抑制剂组侵袭细胞数[(121.00±9.89)个]明显低于阴性对照组[(300.00±9.89)个, t=12.79, P<0.05];而与LZTS2过表达质粒共转染细胞后,miR-9-5p模拟物组+LZTS2 (306.50±7.77)与miRNA阴性对照+空载体组(310.50±7.78)比较,差异无统计学意义( t=0.363, P>0.05)。 结论:miR-9-5p可通过靶向作用于LZTS2基因抑制三阴性乳腺癌细胞侵袭能力。

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第一作者:
第一作者机构: [1]河北医科大学第二医院整形外科,石家庄050000
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