目的 建立液相色谱-串联质谱（HPLC-MS/MS）法检测血浆中地高辛含量，并用于患儿治疗药物监测（TDM）。方法 取血浆样本10μL经乙腈沉淀蛋白，用Phenomenex Kinetex EVO C18（30.0 mm×2.1 mm, 2.6μm）色谱柱分离，流动相为水(含0.05%甲酸和2 mmol·L-1乙酸铵)和甲醇，梯度洗脱，流速：0.55 mL·min-1,进样体积：30μL,柱温：45℃。电喷雾离子源正离子模式，动态多反应监测（dMRM）扫描分析，离子通道分别选择为m/z 798.3→651.3（地高辛）和m/z 801.3→654.3（地高辛-d3）。考察该方法的专属性、标准曲线与定量下限、准确度和精密度、提取回收率、基质效应以及稳定性。结果 地高辛及内标的保留时间均为1.39 min,地高辛在0.25～8.00 ng·mL-1线性良好，代表性的标准曲线方程为y=18.08×10-2x+29.71×10-4（r~2=0.995 77）,批内和批间精密度相对标准偏差均小于15%,提取回收率为91.00%～99.50%,稳定性良好，基质效应符合规定。本方法成功用于65例患儿的地高辛血药浓度测定。结论 本方法操作简便、快速、准确、专属性强，可用于患儿临床治疗药物监测。