摘要：
目的 观察碱性环境中高磷诱导大鼠胸主动脉平滑肌细胞中电导钙激活钾通道(KCa3.1)与大电导钙激活钾通道(KCa1.1)表达的变化,以及探究钙激活钾通道与大鼠胸主动脉平滑肌细胞表型转化之间的关系.方法 采用组织块贴壁法培养原代大鼠主动脉平滑肌细胞,利用10 mmol/L β-甘油磷酸钠制备血管平滑肌细胞钙化模型.使用HCl和NaHCO3调节培养基pH值.细胞随机分为5组:正常pH 7.4组、高磷pH 7.4组、高磷pH 7.7组、高磷pH 8.0组、TRAM-34干预组,共培养4天.用逆转录-聚合酶链反应检测各组细胞中KCa3.1、KCa1.1α、KCa1.1β、Runt相关转录因子2(Runx2)和平滑肌22α(SM22α)表达.结果 与正常pH 7.4组相比,高磷组Runx2水平明显升高,且随着pH升高而表达量增加(P＜0.05);高磷组SM22α水平明显下降,且随着pH升高而表达量减少(P＜0.05).与正常pH 7.4组相比,高磷pH 7.4组KCa3.1表达升高(P＜0.05),KCa1.1α表达下降(P＜0.05).在高磷组中,随着pH升高KCa3.1、KCa1.1α表达量增加(P＜0.05).在同一组中KCa3.1表达高于KCa1.1α(P＜0.05).KCa1.1β表达在3个高磷组间未见统计学差异(P＞0.05).与高磷pH8.0组相比,TRAM-34干预组Runx2mRNA水平明显下降(P＜0.05),SM22α mRNA水平明显上升(P＜0.05).相关分析显示,KCa3.1表达与Runx2表达呈正相关(r=0.945,P＜0.01),与SM22α表达呈负相关(r=-0.926,P＜0.01);在正常pH 7.4组、高磷pH 7.4组中KCa1.1α表达与Runx2表达呈负相关(r=-0.746,P=0.029),与SM22α表达呈正相关(r=0.971,P=0.002);在高磷pH 7.7组、高磷pH 8.0组中KCa1.1α表达与Runx2表达呈正相关(r=0.805,P=0.002),与SM22α表达呈负相关(r=-0.806,P=0.005);KCa1.1β表达与Runx2、SM22α表达不相关(r=0.414,P=0.356;r=-0.155,P=0.714).结论 碱性环境中平滑肌细胞钙激活钾通道表达参与高磷诱导的大鼠胸主动脉平滑肌细胞的表型转化.
