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文章类型：
机构：
[1]河北医科大学第四医院放疗三科,河北,石家庄,050011
河北医科大学第四医院
出处：
ISSN：
关键词：
MDC1
细胞周期
放射敏感性
RNA干扰
摘要：
目的 利用RNA干扰技术抑制食管癌细胞ECA109细胞MDC1基因表达,观察其对细胞周期和放射敏感性的影响.方法 构建MDC1基因的干扰质粒pMDC1-shRNA,与慢病毒包装质粒混合物共同转染293T细胞,收集病毒液,感染ECA109细胞,采用Real-Time PCR和western blotting测定MDC1在mRNA水平和蛋白水平的表达.采用流式细胞术和克隆形成实验,检测RNA干扰对ECA109细胞放射敏感性的影响.结果 成功构建pMDC1-shRNA质粒,转染ECA109细胞.获得稳定转染细胞株ECA109/MDC1,基因MDC1在mRNA水平和蛋白水平的表达均明显降低;5 Gy射线照射后12 h、24 h、48 h,ECA109/MDC1的G2M期比例明显低于阴性对照组和空白对照组;ECA109、ECA109/NEGATIVE、ECA109/MDC1细胞的D0值分别为3.06 Gy、2.90 Gy、1.88 Gy;SF2值分别为0.91、0.89、0.84;Dq值分别为1159、1.47、1.20,显示ECA109/MDC1的D0值、SF2值、Dq值均明显降低.结论 RNAi技术可以有效地抑制食管癌细胞ECA109中基因MDC1的表达,从而增强ECA109细胞对放射线的敏感性.
基金：
国家自然科学基金(30470524;30870743)
第一作者：
第一作者机构：
[1]河北医科大学第四医院放疗三科,河北,石家庄,050011
通讯作者：
推荐引用方式(GB/T 7714)：
刘志坤,祝淑钗,苏景伟,等.靶向沉默人基因MDC1表达对食管癌细胞放射增敏作用的实验研究[J].南方医科大学学报.2010,30(08):1830-1834.
